Screen Quest Fluo-8 NW鈣測定試劑盒提供均勻的熒光測定，用于檢測細胞內(nèi)鈣動員。表達通過鈣發(fā)出信號的感興趣的GPCR的細胞預(yù)加載有可以穿過細胞膜的Fluo-8 NW。一旦進入細胞內(nèi)，F(xiàn)luo-8 NW的親脂性阻斷基團被酯酶裂解，導(dǎo)致帶電荷的熒光染料留在細胞內(nèi)。與鈣結(jié)合后，其熒光大大增強。當用激動劑刺激細胞時，該受體發(fā)出細胞內(nèi)鈣的釋放信號，這顯著增加了Fluo-8 NW的熒光。 Fluo-8 NW具有長波長，高靈敏度和> 100倍熒光增強的特性，是測量細胞鈣的理想指標。 Screen Quest Fluo-8 NW鈣測定試劑盒為監(jiān)測G蛋白偶聯(lián)受體和鈣通道提供了一種優(yōu)化的檢測方法。該測定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進行，并且易于適應(yīng)自動化。

樣品分析方案

概述

用含有0.5-1％FBS的Fluo-8 NW染料加載溶液

在生長培養(yǎng)基中制備細胞（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）

在室溫下孵育1小時

監(jiān)測Ex / Em = 490 / 525nm處的熒光強度